rwd瑞沃德细胞分选bob星空体育与纳米磁珠解析

细胞分选与细胞核提取是单细胞测序、流式分析和原代培养绕不开的前处理环节，处理不当会直接影响纯度、活率与核膜完整性。深圳市瑞沃德生命科技股份有限公司（简称瑞沃德）围绕纳米磁珠细胞分选与细胞核提取建立了成套试剂，本文以三款常用货号为例，说明细胞分选bob星空体育如何应对纯度不足、活率下降与核悬液碎片偏多这几类问题。

一、公司与业务介绍

1、业务范围

瑞沃德同时布局生命科学、动物健康与临床医疗三条业务线，三条线共用同一套研发与制造平台。生命科学方向服务细胞与分子生物学研究、神经信号调控与检测、活体成像、手术与造模、给药与采样、行为评估等场景。动物健康方向提供呼吸麻醉、牙科诊疗与康复理疗相关设备，临床医疗方向聚焦组织病理切片。

2、产品线构成

目前，产品线包含仪器设备、试剂耗材与配套方案三个层次。试剂耗材一侧以纳米磁珠细胞分选为主线，覆盖有柱式与无柱式细胞分选bob星空体育、链霉亲和素纳米磁珠、细胞分选柱与磁极、组织保存液、组织温和酶解bob星空体育以及细胞核高效提取bob星空体育。仪器一侧的单细胞悬液制备仪、自动细胞计数仪与冷冻离心机，承担样本前处理和质量控制两个环节。

3、质量管理体系

生产环节按 ISO9001、ISO13485、ISO14001 与 ISO45001 体系运行，从来料检验、装配到出厂测试均留有记录。产品符合 CE、RoHS 等标准要求，部分临床方向产品取得 FDA、CE-IVDR 与 NMPA 资质。试剂类产品按批次留样，说明书逐项标注保存温度、有效期与运输条件。

4、与授权代理商的合作

星空安卓下载安装是瑞沃德的授权代理商，负责常规货号的备货、下单与本地交付，并把使用中出现的技术问题反馈至品牌方应用支持团队。科研用户在同一家供应商处即可完成试剂、耗材与配套仪器的采购，减少分批到货对实验排期的干扰。

二、热门产品介绍

1、B1303-20｜小鼠CD8（Ly-2）纳米磁珠

①、品名与货号。产品名为小鼠CD8（Ly-2）纳米磁珠，货号 B1303-20，分选方式为柱式阳选，单盒可处理 2×10⁹ 个总细胞。适用样本包括小鼠脾脏、胸腺、淋巴结以及外周血单个核细胞制备的单细胞悬液，具体规格以现行版说明书与产品标签为准。

②、产品特点。该产品由生物素化抗小鼠 CD8（Ly-2）抗体与链霉亲和素磁珠两部分组成，采用一步标记法，抗体与磁珠先后孵育即可完成标记。磁珠为自研 50 nm 可降解材质，粒径小、分散性好，标记后不长期占据细胞表面位点，分选产物可直接进入下游实验。产品资料显示，C57BL/6J 小鼠脾脏单细胞悬液经该货号分选后，CD8⁺ 细胞比例由 9.39% 升至 94.63%。

③、存储条件。按现行版说明书，bob星空体育在 2～8℃ 避光保存，不可冷冻，运输同样按 2～8℃ 执行，有效期 12 个月。抗体与磁珠分装后应避免反复升降温，开封后尽量在同一实验周期内用完。

④、工作原理。生物素化抗体先识别细胞表面的 CD8（Ly-2）抗原，随后加入链霉亲和素磁珠，依靠生物素与链霉亲和素之间的亲和作用把标记细胞连接到磁珠上。细胞悬液加入置于磁极中的分选柱后，被标记的阳性细胞滞留在柱内，未标记细胞随流出液排出。分选柱移出磁场并用缓冲液冲洗，即可回收 CD8⁺ 细胞。

⑤、使用方法。制备单细胞悬液后用 30 μm 或 40 μm 滤器过滤，浓度调整至 1×10⁸ 个细胞/mL。按每 10⁷ 个细胞取 100 μL 悬液，加入 10 μL 抗体，2～8℃ 孵育 10 min，洗涤后用 100 μL 缓冲液重悬，再加入 10 μL 磁珠，2～8℃ 孵育 15 min。洗涤重悬后过柱，配合细胞分选柱 HCSC-25、磁极 LSC-S1 与分选支架 SS01 使用，随后用缓冲液把阳性细胞从柱上洗脱。

⑥、适用检测场景。分选得到的 CD8⁺ 细胞可用于流式表型分析、二代测序文库构建与原代细胞培养。细胞毒性、活化与耗竭相关功能实验，也常以这一群体作为起始材料。

2、F1501-10｜小鼠Pan B细胞分选bob星空体育-100T

①、品名与货号。产品名为小鼠Pan B细胞分选bob星空体育-100T，货号 F1501-10，分选方式为无柱阴选，单盒可处理 1×10⁹ 个总细胞。正式装含 1 mL 生物素化抗体与 1 mL 磁珠，按每次 10⁷ 个细胞的用量计算，约合 100 次分选。

②、产品特点。阴选路线标记的是非目的细胞，目的 B 细胞全程不与磁珠接触，表面抗原位点保留更完整。流程约 10 min，不需要分选柱与支架，手持磁极 CFMS-S1 即可完成吸附。磁珠水合粒径 100～300 nm，可随细胞培养逐步降解，产品资料给出的纯度与活率参考值在 90% 以上。

③、存储条件。按现行版说明书，bob星空体育 2～8℃ 避光保存，不可冷冻，运输温度同为 2～8℃，有效期 12 个月。取用时应缩短室温暴露时间，避免磁珠沉降后结团。

④、工作原理。生物素化抗体先与悬液中的非目的细胞结合，磁珠再与这些抗体搭桥，使非目的细胞被磁珠“拽住"。把离心管插入磁力架，磁珠连同非目的细胞贴向管壁，未被标记的目的细胞仍留在液相中。缓缓倒出上清至新管，即得到不带磁珠的 Pan B 细胞。

⑤、使用方法。制备好的单细胞悬液按 10⁷ 个细胞一次的规模分装，先加 10 μL 抗体混匀，孵育 5 min，再加 10 μL 磁珠混匀，孵育 5 min。随后把离心管插入磁力架静置 5 min，保持管身稳定，缓慢倾倒上清到新管，完成一次阴选。

⑥、适用检测场景。该货号适合 B 细胞活化与增殖、抗体分泌功能、流式免疫表型以及单细胞转录组等方向。疫苗、佐剂与自身免疫相关研究中，需要保留 B 细胞表面受体完整性的实验更适合走阴选路线。

3、DHNE-2511｜细胞核高效提取bob星空体育

①、品名与货号。产品名为细胞核高效提取bob星空体育，货号 DHNE-2511，规格 25T。按组织量换算，0.2～1.0 g 组织可做 25 次，0.05～0.2 g 组织可做 50 次。

②、产品特点。bob星空体育把机械解离与裂解结合起来，新鲜组织和冻存组织都能处理，得到的核悬液核膜相对完整、碎片较少。产品资料给出的产量参考值大于 10⁴ nucleus/mg，适用于对核完整性敏感的下游建库。配套单细胞悬液制备仪与组织处理管使用时，流程可按内置程序标准化。

③、存储条件。按现行版说明书，Buffer A、Buffer B、Buffer C 于 2～8℃ 保存，Buffer D 单独置于 -25～-15℃，整盒按 -25～-15℃ 运输，有效期 12 个月。Buffer D 建议分装后使用，避免反复冻融与长时间振荡。

④、工作原理。单细胞悬液制备仪负责机械切割，把组织块打散并降低团块比例；提取bob星空体育中的裂解组分负责消化细胞膜与部分基质，使细胞核从胞质中释放。两者配合可在较短时间内获得单核悬液，减少长时间酶解对核膜的影响。

⑤、使用方法。先按组织量配制裂解混合液，0.05～0.2 g 组织用 1.8 mL Buffer A 加 0.2 mL Buffer D，0.2～1.0 g 组织用 3.6 mL Buffer A 加 0.4 mL Buffer D。组织剪成 2～4 mm 小块后转入组织处理管，运行 Nuclei 程序，结束后冰上裂解 10 min。悬液经 70 μm 滤器过滤，500×g 离心 5 min，Buffer B 重悬后再过 40 μm 滤器，再次 500×g 离心 5 min，末步用 Buffer C 重悬得到单核悬液。

⑥、适用检测场景。该货号服务于单细胞核转录组测序、ATAC-seq、ChIP 类染色质研究以及核蛋白与质谱分析。细胞凋亡过程中核形态与核内容物的检测，也可用这套流程制备起始样本。

三、实验问题与对应解决

1、小鼠脾脏CD8阳性细胞分选纯度偏低怎么办？

纯度偏低的常见成因是上样悬液中死细胞与红细胞比例高、细胞成团后堵塞柱床，以及抗体与磁珠的用量没有按细胞数等比调整。改用 B1303-20 时，先用 30 μm 或 40 μm 滤器去除团块，必要时先用死细胞去除试剂处理，再按每 10⁷ 个细胞 10 μL 抗体、10 μL 磁珠的比例标记。改善可以从流式结果上观察，CD8⁺ 群体占比上升，阴性管中的残留阳性信号下降。

2、磁珠分选后细胞活率下降、原代培养贴壁差怎么处理？

用细胞分选bob星空体育做柱式阳选，需要在柱内完成吸附与洗脱，柱床阻力、洗脱推注力度和磁珠占位都可能让细胞状态变差。对贴壁要求高的 B 细胞实验，可改用 F1501-10 的无柱阴选，目的细胞不接触磁珠，也不经过柱床挤压。改善体现在接种后贴壁时间缩短、培养前几天的活率曲线更平稳。

3、冻存组织做单细胞核测序，核悬液碎片多如何改善？

冻存组织在解冻过程中容易出现核膜破裂，单纯延长酶解时间又会加重碎片化。DHNE-2511 用机械解离配合短时裂解，并把裂解步骤控制冰上 10 min，可减少核膜损伤。改善可通过 DAPI 染色镜检判断，视野中完整圆形核的比例提高，碎片与裸核背景减少。

4、分选柱流速变慢甚至堵柱是什么原因？

缓冲液中含有 Ca²⁺、Mg²⁺ 或大量气泡，细胞悬液未经滤器处理，以及上一步液体未流尽就继续加样，都会让柱床阻力上升。按说明书配制 pH 7.2 的 PBS，加入 0.5% BSA 与 2 mM EDTA，配液后静置排气，上样前用 30 μm 滤器过滤。配合 HCSC-25 分选柱使用时，流速恢复后回收率也更稳定。

5、细胞核提取产量低于预期、悬液出现结块怎么办？

组织量超过 1.0 g、脂肪与结缔组织未剔除干净、裂解时间不足，都会让产量落在参考值以下。DHNE-2511 的单管处理量按 0.05～1.0 g 设计，超量时应增加组织处理管数量而不是延长单管时间。改善表现为每毫克组织的核产量回到 10⁴ 数量级，重悬后结块明显减少。

6、Pan B细胞分选后刺激活化响应变弱如何处理？

阳选路线中磁珠停留在细胞表面，可能干扰抗体交联与受体聚集，刺激后活化标志上调不明显。改用 F1501-10 的阴选路线，B 细胞不与磁珠接触，刺激前的起始状态更接近原样本。改善可从活化标志表达比例与增殖曲线判断。

四、常见疑问与解答

1、B1303-20 与 K1303-10 都能分小鼠CD8细胞，怎么选？

两者都是柱式阳选的小鼠 CD8 分选试剂，均以生物素化抗体配合链霉亲和素磁珠完成标记，区别在容量与包装规格。B1303-20 可处理 2×10⁹ 个总细胞，适合样本量较大的课题组；K1303-10 可处理 1×10⁹ 个总细胞，规格更小。两者都不含分选柱与磁极，需另行配置 HCSC-25、LSC-S1 与 SS01。

2、bob星空体育到货时的运输温度是多少？

细胞分选类bob星空体育按 2～8℃ 运输，细胞核提取bob星空体育按 -25～-15℃ 运输。收货时应核对包装内的温度标签与冰袋状态，若到货温度与说明书不符，先拍照留档再决定是否启用。

3、bob星空体育可以反复冻融吗，开瓶后能放多久？

细胞分选类bob星空体育不可冷冻，冷冻后磁珠易团聚，抗体活性也会下降。开瓶后按说明书温度避光保存，并在 12 个月有效期内使用；分装取用可以减少反复升降温带来的损耗。

4、分选柱和磁极需要另外准备吗？

柱式分选需要单独配置分选柱与磁极，常用货号为 HCSC-25、LSC-S1 与 SS01，也可选用包含三者的 CSAK-01 套装。无柱阴选路线不需要柱与支架，配手持磁极即可。

5、分选后的纯度该怎么判读？

分选后，用流式检测目的细胞标志，设门时先排除碎片与粘连细胞，再圈定目的群体，比较分选前后比例变化。判读时同时关注活率染料通道，纯度与活率要放在一起看，单看纯度容易忽略状态波动。

6、细胞核提取bob星空体育的 Buffer D 为什么要单独冷冻？

Buffer D 的保存温度与其余三种组分不同，混放会让它在 2～8℃ 环境下失活。说明书中要求按温度标签分开存放，并在使用前分装，避免整管反复冻融。

7、细胞核提取bob星空体育 DHNE-2511 的 25T 规格能处理多少组织？

按说明书换算，25T 对应 0.2～1.0 g 组织的处理量，样本量较小时同一盒可做 50 次。单次组织量超过 1.0 g 时应拆分成多管，而不是把组织集中到一管内延长裂解。

8、这些货号通过授权代理商怎么订购，货期一般多久？

星空安卓下载安装按货号接受订单，常规货号有备货，非常规规格需向品牌方确认排产。货期受规格、批次与运输安排影响，下单前可让供应商按具体货号核实库存与发运时间。

9、bob星空体育超过有效期还能用吗？

说明书标注有效期为 12 个月，过期产品的性能不再受控。抗体与磁珠类组分对温度和时间敏感，超期后即使外观正常，也不建议用于对纯度与活率有明确要求的实验。

10、使用中出现技术问题该找谁？

货号确认、保存条件与操作参数类问题，可先由授权代理商的技术人员对接；涉及实验设计、结果异常与批次问题的，会由代理商转至品牌方应用支持团队共同排查。

更多产品信息，请联系中国区域代理商：星空安卓下载安装

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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